藥物代謝?營養吸收?腸道通透性評價系統

藥物代謝·營養吸收·腸道通透性評價系統

——KingTech系列尤斯灌流系統（Ussing Chamber System）

【方法簡介】
20世紀50年代，丹麥學者Hans Ussing 將Ussing chamber（尤斯室或尤斯灌流室）介紹于世，該裝置模擬上皮組織在體內的環境，并能長時間維持其活性；通過微電極檢測跨上皮電信號及其在藥物和營養物質轉運條件下的變化，來反映腸道藥物代謝、營養物質吸收及通透性等的變化。伴隨著Ussing Chamber設計的不斷改進，其應用也越來越廣泛。目前，幾乎所有的上皮都有利用Ussing Chamber研究的報道，包括消化道、呼吸道、生殖道、眼角膜、培養的單層上皮細胞等等。 研究的方向主要集中藥物吸收、營養吸收、腸道通透性、以及離子通道機制等。 

【系統配置】
KingTech尤斯灌流系統主要由三個單元組成：
（1）    尤斯室（Ussing chamber）：固定上皮組織并維持活性
（2）    電壓電流鉗：測量上皮組織電生理信號
（3）    數據采集系統：采集并記錄數據
由于實驗過程時間較長，而且一般要做模型組與對照組的比較，所以多通道系統是比較好的選擇。通道越多，一次獲得的數據越多，實驗成本也越低。而的系統為六通道。

KingTech（金泰公司）是專業和的尤斯系統制造商，其尤斯室品種涵蓋了所有可能的應用，從zui初的電極前插式尤斯室（P2300），到可自動灌流和停留循環的雙模式尤斯室（C3300），再到式的電極豎插式尤斯室（C4300）。另外還有適合于低轉運量的P2400尤斯室、用于分泌物滴定的P2300B尤斯室、以及于牛羊瘤胃上皮的C500尤斯室。其中的C4300電極豎插式尤斯室成為目前和的尤斯室。

【C4300電極豎插式尤斯室】

尤斯室是用來固定上皮組織并維持活性的裝置。它由兩個半室組成，中間插入固定組織的樣本夾。兩側半室裝有等量的、對稱的Ringer溶液，用于消除上皮兩側化學、機械及電性的驅動力。的C4300電極豎插式尤斯室是設計的產品，采用高透明亞克力材質制作而成，電極豎插在小室中。
不同于老式的U型玻璃管尤斯室，也不同于普通的電極水平安裝的尤斯室，C4300具有以下優點：
?    體積小巧，結構緊湊，大大節省實驗空間；
?    容積2-8ml，節省藥物用量；
?    電極在小室上方，電極填充液不會滲漏，電極中不會進氣，鹽水也腐蝕不到電極接插件；
?    更換電極不需要先排空小室溶液。這種設計的好處是，既免除了繁瑣的操作，同時又避免組織長時間暴露在空氣中而降低存活時間；

【VCC MC6 Plus電壓電流鉗】
VCC MC6 Plus是六通道的電壓電流鉗，它包括六個獨立的電壓電流鉗模塊、一個內置的脈沖發生器、以及一套中控開關，并且附帶一個多檔位的標準信號模擬器。通過電極電纜與多通道尤斯室連接，可連續監測組織的電壓、電流、電阻和電導；而中控開關可以同時控制六個通道的操作。
VCC MC6 Plus是在原VCC MC6的基礎上優化改進的，每個通道都有流阻補償的量程旋鈕，對于不同面積的組織，不需要像VCC MC6那樣需要打開機箱調節量程。

【UCRS2.0數據采集系統】
UCRS2.0數據采集系統是專門設計用于多通道尤斯系統的數據采集系統，包括DA1008采集器、UCRS2.0軟件以及數據電纜。DA1008采集器提供16位的分辨率和200K/s的采樣速率，通過USB線與計算機連接。UCRS2.0軟件提供譜圖曲線和原始數據表的實時記錄顯示，可通過DA1008采集器控制多通道電壓電流鉗的按鍵，并有脈沖開關功能。
UCRS2.0數據采集系統與VCC MC6 Plus電壓電流鉗連接，可同時采集多達八個通道的尤斯室組織信號。

【應用領域】
1、藥物代謝的研究：例如，藥物經腸道的吸收和轉運機制、藥物經皮膚的吸收及轉運機制。
2、胃腸道異常功能的研究，例如，正常的胃腸道黏膜組織、非正常的胃腸道黏膜組織，如缺血缺氧、炎癥反應、營養障礙等微生態環境改變時導致的胃腸道屏障功能的變化。
3、營養物質轉運機理研究：葡萄糖、小肽、游離脂肪酸、氨基酸和礦物質元素等物質吸收轉運效率的研究。
4、用于其他上皮組織的吸收：
?    腎小管內皮細胞對營養物質或藥物的排泌功能研究。
?    皮膚上皮細胞對營養物質或藥物的吸收機能的研究。
?    其他上皮組織，如大鼠結腸、小鼠回腸、青蛙皮膚、氣道上皮、視網膜上皮、膀胱壁、支氣管粘膜等。